免疫疗法是当下肿瘤治疗领域最具前景的发展方向之一。随着PD-1/PD-L1等免疫检查点抑制剂应用范围逐渐扩大，CAR-T与CTL疗法研究不断出现新的进展，研究的抗原靶点也越来越多，对复发、难治性肿瘤患者也可能有突破性疗效，其中包含血液肿瘤与实体瘤。

深圳市免疫基因治疗研究院（ShenZhen Geno-immune Medical Institute）是经深圳市人民政府批准设立的具有独立法人资格的二级事业单位。研究院主要研究方向是针对癌症的CAR-T免疫细胞治疗及针对基因相关疾病的治疗。团队是由张隆基教授带领的学术、临床研究和产业化经验丰富的国际领军科学家组成。其中，我院应用世界领先的CAR基因工程专业平台、最先进的基因载体以及T细胞扩充技术，针对不同癌症开发研究不同的CAR，生产一系列的CAR-T细胞药物和相应的治疗技术服务。本单位自行开展研发的CAR-T细胞治疗技术，是世界上第一个应用到人体的第四代CAR-T技术，具有低毒性、高效果、快速制备的极大优势，已治疗超过1000病例以上，是目前顶尖的癌症治疗先进技术方案。CAR-T技术靶向肿瘤抗原，可以针对多种不同肿瘤，因此靶点的正确选择是CAR-T有效性和安全性的基础。CAR-T靶向的肿瘤抗原可分为两类：

肿瘤专一--肿瘤特异抗原（tumor specific antigen, TSA)：是肿瘤细胞特有的，只存在某些肿瘤细胞而不表达在正常细胞的抗原，这是最理想的抗原。靶点抗原的特异性越高，CAR-T细胞就可越专一地针对特定的肿瘤细胞，从而降低机体不良反应。但这种理想的抗原并不多。
 

非肿瘤专一--肿瘤相关抗原 (tumor-associated antigen, TAA)：是指除了肿瘤细胞表达、正常细胞和其他组织上也表达的抗原，只是其表达量在癌细胞明显增高。此类抗原只表现出量的变化，而无严格肿瘤特异性，目前大部分应用的肿瘤抗原靶点都是TAA。

肿瘤有哪些可用的靶点：病理诊断是诊断肿瘤的“金标准”。免疫组化(immunohistochemistry, IHC) 染色，即免疫组织化学检测，是病理诊断中常用的检测手段。对送检标本，进行切片、染色，进而根据抗体反应标记的显色，来确定组织细胞的抗原，对其进行定位、定性及定量的研究。免疫组化对于CAR-T疗法，针对肿瘤细胞表面抗原的定位和制备有很大的帮助，有助于制定治疗方案，也有助于追踪肿瘤治疗后的抗原变异情形。下面就来聊聊如何透过免疫组化来确定靶向方案。

免疫组化结果中会用“+”或“-”以及强度数值表示

“+”代表免疫组化中颜色为阳性，也就是所检测的指标有表达；

“-”则表示阴性也就是没有染色上，即无表达。

“+”旁的数值代表阳性强度，研究院的IHC以0~4的强度去划分这细胞抗原强度表达，数值越大表示抗原呈现越强，也越有利于免疫细胞去辨识。

免疫组化结果中会有“%”数值表示

免疫组化染色通常取样是采用患者的肿瘤组织白片，肿瘤组织是复杂的肿瘤细胞聚合体，有可能各自细胞上会带有不同的肿瘤抗原。研究院的IHC %代表这阳性抗原在肿瘤组织上的面积表达，%越大肿瘤抗原一致性越高，免疫靶向治疗靶向肿瘤的范围就越大。

免疫组化常用指标有哪些？

根据患者肿瘤分类，会选择不同的免疫组化抗原检测方案，例如B细胞血液肿瘤、淋巴瘤相关的会选择CD19、CD22等检测；脑瘤、神经肿瘤相关的就会染GD2、Her2等靶点；肝癌染AFP；肉瘤染GD2、B7-H3 （CD276）…等。研究院对不同癌症种类的IHC检测有丰富的经验，且拥有免疫细胞和肿瘤标记物等多种生物标记物的检测抗体，一份IHC检测报告可同时查看15种以上靶向抗原表达，让后续的CAR-T制备能有更多应用选择。

IHC不同靶点检测，所需要的时间也不一样

用于免疫组化的抗体多种多样，生产厂商、抗体的克隆位点、抗体来源等因素都会影响抗体与组织上抗原的结合，这导致不同靶点的检测时间产生差异。研究院对用于检测的不同抗体进行测试，确定抗体的特异性，并探索抗体的最佳染色条件，提高检测结果的准确率。因不同靶点同时检测，一般IHC检测报告会需要1周左右时间。

IHC检测的准确率高吗？

IHC的原理都相同，但检测的流程和抗体的选择各有差异。任何一种生物学检测方法，准确率都不可能达到100%。但是，目前国际、国内共识中推荐使用的免疫组化检测方法，都是经过大量实验数据验证和评估的，一般都能很好地反应肿瘤的抗原状态。所以，虽然不同的IHC检测方法敏感性、特异性之间有差别，但总体而言，检测技术的稳定性与成熟，也决定了染色结果的可靠性。

染色报告如何确定靶向？

IHC染色报告的解读，以专家的意见为主。会根据肿瘤抗原白片的情况作出判断。每种肿瘤的恶性程度和性质有关，所以对癌症术后的样本白片，病理报告一定要详细复查。通过IHC检测肿瘤标记物可以对肿瘤进行定位，了解病情严重程度。根据IHC染色强弱，决定免疫治疗靶向抗原的使用顺序，进行治疗规划，例如：脑瘤患者IHC结果显示GD2阳性表达，且强度有4，面积高达90%，而Her2 IHC结果也是阳性，强度3，面积80%；那GD2 CAR-T就可以当做免疫细胞治疗首选方案，后续也可搭配Her2 CAR-T去补强，可防止肿瘤逃逸或复发。目前研究院IHC标靶已经有50种抗原选择，根据不同肿瘤可多重去检测，临床实际常用的也有38种。这些标记物可以反映治疗前后肿瘤细胞的增殖和抗原表达情况，也在病情诊断、疾病预防、免疫细胞治疗等方面发挥着重要作用。